熒光定量PCR儀是一種利用特定熒光信號來檢測、定量PCR反應(yīng)產(chǎn)物的設(shè)備。和傳統(tǒng)PCR相比，熒光定量PCR儀具有高靈敏度、準(zhǔn)確性、快速性和高通量等優(yōu)點(diǎn)，廣泛用于基礎(chǔ)和應(yīng)用生物學(xué)研究、臨床醫(yī)學(xué)診斷以及環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。
熒光定量PCR儀的工作原理是利用熒光染料來判斷PCR反應(yīng)產(chǎn)物的數(shù)量。PCR反應(yīng)過程中，特定的熒光探針會結(jié)合到PCR產(chǎn)物上，并在PCR反應(yīng)過程中放出熒光信號。熒光強(qiáng)度隨PCR產(chǎn)物數(shù)量的增加而增強(qiáng)，可以通過檢測這種熒光信號來定量PCR產(chǎn)物的數(shù)量。為了保證熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性，使用熒光定量PCR儀需要滿足以下要求：
1.選擇合適的熒光染料：不同的熒光染料適用于不同的PCR反應(yīng)體系，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適的熒光染料。
2.始終保持PCR儀干凈：使用前應(yīng)清潔PCR儀內(nèi)部，避免污染和干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
3.合理設(shè)置PCR反應(yīng)條件：包括反應(yīng)體系組成、PCR循環(huán)程序、熒光定量條件等，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計和要求選擇最佳的反應(yīng)條件。
4.對熒光定量PCR結(jié)果進(jìn)行質(zhì)量控制：在進(jìn)行PCR反應(yīng)前，應(yīng)檢查PCR反應(yīng)體系的光學(xué)性能，以確保熒光信號的精準(zhǔn)度和可靠性。
5.進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和解釋：合理分析和解釋熒光定量PCR結(jié)果，需要充分了解PCR技術(shù)的原理和實(shí)驗(yàn)條件。
